紫外分光光度計的吸光度及雜散光如何校正?
吸光度的校正方法:校正吸光度常用一很純物質一定濃度的溶液為標準,且此溶液的吸光度係數經不同實驗室核對,為了使標準液吸光度不受測定波長的微移動而有改變,常選擇具有較平滑吸收高峰的物質,同時要求溶液穩定,且在相當的波長範圍內吸收度的改變符合Beer-Lambert定律,常用硫酸銅、硫酸銨鈷和硝酸鈉或鉀的溶液。鉻酸鉀溶液是*常用的標準溶液,此溶液在紫外區和可見區均適用。 雜散光的校正方法:小量的雜散光往往會引起較大的測量誤差,它的校正可用一個能完全吸收某一波長單色光,且在其他波長吸收很弱的溶液。從這個溶液所表現的透光情況可推測雜散光的近似值。由雜散光帶來的偽吸收帶,亦可用Beer-Lambert定律來檢查,但用此定律檢查偽吸收帶誤差較大。由切斷範圍之外所表現的透射比可得出近似的雜散光百分數。若所含雜散光大於0.1%,應設法減低,或對測得的吸收光度進行校正。由雜散光引起的誤差與雜散輻射成正比,因此校正值很容易從化合物的近於正確的曲線計算而得。此外,還可用一個適當的濾光片,該濾光片在測定波長範圍內完全透光,但吸收此範圍外的光波,由此來消除雜散光。
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